Створення рекомбінантних конструкцій рECFP-C3-USP1-domain-1 та рECFP-C3-USP1-domain-2 як ключових інструментів вивчення доменної організації білка USP1 та їх ролі у взаємодії з онкобілком Bcr-Abl

  • А. С. Матвєєнко Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м Київ, вул. Акад. Заболотного, 150; Київський національний університет технологій та дизайну, Україна, 01011, м. Київ, вул. Мала Шияновська, 2
  • С. В. Антоненко Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м Київ, вул. Акад. Заболотного, 150 https://orcid.org/0000-0003-0212-3779
  • Д. С. Гур’янов Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м Київ, вул. Акад. Заболотного, 150 https://orcid.org/0000-0003-0594-2286
  • Г. Д. Телегеєв Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м Київ, вул. Акад. Заболотного, 150 https://orcid.org/0000-0003-0270-4397
DOI: https://doi.org/10.7124/FEEO.v36.1715
Ключові слова: хронічна мієлоїдна лейкемія (ХМЛ), онкобілок Bcr-Abl, убіквітин-специфічних протеаз (USPs), USP1, домени USP1

Анотація

Мета. Створення рекомбінантних конструкцій pECFP-C3-USP1-domain-1 та pECFP-C3-USP1-domain-2, необхідних для вивчення особливостей доменної організації білка USP1, визначення їх ролі у функціонуванні USP1 та взаємодії із онкобілком Bcr-Abl. Методи. У дослідженні використовувались стандартні методи молекулярного клонування, включаючи зокрема ПЛР, лігування, рестрикція, методи виділення та очищення ДНК. Результати. Були змодельовані та успішно отримані генетичні конструкції pECFP-C3-USP1-domain-1 та pECFP-C3-USP1-domain-2, що кодують ключові домени білка USP1. Висновки. Отримані генетичні конструкції pECFP-C3-USP1-domain-1 та pECFP-C3-USP1-domain-2, будуть використані для вивчення ролі доменів у функціонуванні білка USP1, його субклітинної локалізації та особливостей утворення білкового комплексу Bcr-Abl/USP1, що сприятиме кращому розумінню його ролі у клітинних процесах та розвитку нових терапевтичних підходів у лікуванні ХМЛ.

Посилання

Chereda B., Melo J. V. Natural course and biology of CML. Ann Hematol. 2015. Vol. 94. P. 107–121. https://doi.org/10.1007/s00277-015-2325-z.

Kang Z., Liu Y., Xu L., Long Z., Huang D., Yang Y. The Philadelphia chromosome in leukemogenesis. Chin Journal of Cancer. 2016. https://doi.org/10.1186/s40880-016-0108-0.

Jabbour E., Kantarjian H. Chronic myeloid leukemia: 2020 update on diagnosis, therapy and monitoring. American Journal of Hematology. 2020. Vol. 95. P. 691–709. https://doi.org/10.1002/ajh.25792.

Bakkar M., Khalil S., Komal B., Kushwaha N. Ubiquitin-Specific Protease Inhibitors for Cancer Therapy: Recent Advances and Future Prospects. Biomolecules. 2025. Vol. 15 (2). P. 240. https://doi.org/10.3390/biom15020240.

Nishchenko D., Antonenko S., Guryanov D., Telegeev G. Features of expression and localization of USP1 in different types of malignant neoplasms. Experimental factors of organism evolution. 2024. Vol. 34. P. 88–94. https://doi.org/10.7124/FEEO.v34.1622. [in Ukrainian]

Xia Zhang, Peng Peng, Li-Wei Bao Ubiquitin-Specific Protease 1 Promotes Bladder Cancer Progression by Stabilizing c-MYC. Cells. 2024. Vol. 13. P. 1798. https://doi.org/10.3390/cells13211798.

Boyko S. The Role of Deubiquitinating Enzymes in Chromatin Regulation. FEBS Lett. 2010. Vol. 585. P. 216–2023. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2010.10.042.

Antonenko S., Telegeev G. Inhibition of USP1, a new partner of Bcr-Abl, results in decrease of Bcr-Abl level in K562 cells. Experimental Oncology. 2023. Vol. 42 (2). P. 109–114. https://doi.org/10.32471/exp-oncology.2312-8852.vol-42-no-2.14533.

UniProt. Retrieved from: https://www.uniprot.org/uniprotkb/O94782/entry#sequences.

Antonenko S., Zavelevich M., Telegeev G. The role of USP1 deubiquitinase in the pathogenesis and therapy of cancer. Acta Biochimica Polonica. 2023. Vol. 70 (2). P. 219–231. https://doi.org/10.18388/abp.2020_6636.

Dharadhar S., Dijk W. J., Scheffers S., Fish A., Sixma T. K. Insert L1 is a central hub for allosteric regulation of USP1 activity. EMBO reports. 2021. Vol. 22 (4). https://doi.org/10.15252/embr.202051749.

Liang X.-W., Wang S.-Z., Liu B. A review of deubiquitinases and their roles in tumorigenesis and development. Front Bioeng Biotechnol. 2023. Vol. 11. P. 88–94. https://doi.org/10.3389/fbioe.2023.1204472.