Особливості ізолювання екзосом з міцелію трутовика лакованого

  • М. Палладін Інститут харчової біотехнології та геноміки НАН України, Україна, 04123, м. Київ, вул. Байди-Вишневецького, 2А
  • А. І. Ємець Інститут харчової біотехнології та геноміки НАН України, Україна, 04123, м. Київ, вул. Байди-Вишневецького, 2А https://orcid.org/0000-0001-6887-0705
DOI: https://doi.org/10.7124/FEEO.v37.1768
Ключові слова: Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., міцелій, екзосоми, ізолювання

Анотація

Мета. Застосувати запропоновані методи отримання екзосом та підібрати умови для ефективного ізолювання цих нановезикул з міцелію гриба трутовика лакованого (Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst.). Отримати екзосоми з клітин міцелію G. lucidum та провести їх морфометричний аналіз. Методи. Для отримання та аналізу ізольованих екзосом з міцелію гриба трутовика лакованого використовували мікробіологічні, мікроскопічні, седиментаційні та спектрофотометричні методи досліджень. Результати. Протестовано різні методи ізолювання екзосом та підібрано ефективний спосіб подрібнення, гомогенізації та очистки екзосом із міцелію G. lucidum, культивованого в умовах in vitro. Вперше проведено ізолювання та первинну ідентифікацію екзосом з міцелію G. lucidum. Висновки. Розроблений підхід для ізолювання екзосом з міцелію гриба G. lucidum, вирощеного у стаціонарних асептичних умовах in vitro, є важливим етапом для подальшого дослідження біологічної активності цих нановезикул та можливості їх практичного застосування.

Посилання

Rodrigues M. L., Nimrichter L. From fundamental biology to the search for innovation: The story of fungal extracellular vesicles, Eur. J. Cell Biol. 2022. Vol. 101 (2). 151205. https://doi.org/10.1016/j.ejcb.2022.151205.

Kalluri R., LeBleu V. S. The biology, function, and biomedical applications of exosomes. Science. 2020. Vol. 367 (6478). eaau6977. https://doi.org/10.1126/science.aau6977.

Wang C., Li Z., Liu Y., Yuan L. Exosomes in atherosclerosis: performers, bystanders, biomarkers, and therapeutic targets. Theranostics J. 2021. Vol. 11 (8). P. 3996–4010. https://doi.org/10.7150/thno.56035.

Yu D., Li Y., Wang M. et al. Exosomes as a new frontier of cancer liquid biopsy. Mol. Cancer J. 2022. Vol. 21 (1). 56. https://doi.org/10.1186/s12943-022-01509-9.

Harding C. V., Heuser J. E., Stahl P. D. Exosomes: looking back three decades and into the future. J. Cell Biol. 2013. Vol. 200 (4). P. 367–371. https://doi.org/10.1083/jcb.201212113.

Rodrigues M. L., Nimrichter L. From fundamental biology to the search for innovation: The story of fungal extracellular vesicles. Eur. J. Cell Biol. 2022. Vol. 101 (2). 151205. https://doi.org/10.1016/j.ejcb.2022.151205.

Liebana-Jordan M., Brotons B., Falcon-Perez J. M., Gonzalez E. Extracellular vesicles in the Fungi Kingdom. Int. J. Mol. Sci. 2021. Vol. 22 (13). 7221. https://doi.org/10.3390/ijms22137221.

Lee K. H., Morris-Natschke S. L., Yang X. et al. Recent progress of research on medicinal mushrooms, foods, and other herbal products used in traditional Chinese medicine. J. Tradit. Complement Med. 2012. Vol. 2 (2). P. 84–95.

Sohretoglu D., Huang S. Ganoderma lucidum polysaccharides as an anti-cancer agent. Med. Chem. 2018. Vol. 18 (5). P. 667–674. https://doi.org/10.2174/1871520617666171113121246.

Cancemi G., Caserta S., Gangemi S., Pioggia G., Allegra A. Exploring the therapeutic potential of Ganoderma lucidum in cancer. J. Clin Med. 2024. Vol. 13 (4). 1153. https://doi.org/10.3390/jcm13041153.

Liu B., Lu Y., Chen X. et al. Protective role of shiitake mushroom-derived exosome-like nanoparticles in D-galactosamine and lipopolysaccharide-induced acute liver injury in mice. Nutrients. 2020. Vol. 12 (2). 477. https://doi.org/10.3390/nu12020477.

Ikeda M. A. K., Campos R. M. S., Da Silva J. L., Ferreira K. S. Fungal extracellular vesicles: isolation, characterization, and the immune system response. Microbiol. Res. 2024. Vol. 15 (4). P. 2146–2161. https://doi.org/10.3390/microbiolres15040144.

Piffer A. C., Reis F. C. G., Moyrand F. et al. Protocol for separation of fungal extracellular vesicles using ultracentrifugation from solid medium cultures, STAR Protocols. 2024. Vol 5 (2). 103069. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2024.103069.

Yang X., Zong Z., Niu B. et al. Shiitake mushroom-derived extracellular nanovesicles: Preparation, characterization, and inhibition of Caco-2 cells, Food Chemistry. 2025. Vol. 463 (3). 141339. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2024.141339.