Розробка ПЛР тест-системи для детекції коронавірусної хвороби котів

  • М. В. Галаєва ТОВ «ВИРОБНИЧА ФІРМА СІМЕСТА», Україна, 65005, м. Одеса, вул. Мельницька, буд. 20а https://orcid.org/0000-0001-8133-5184
  • О. В. Галаєв ТОВ «ВИРОБНИЧА ФІРМА СІМЕСТА», Україна, 65005, м. Одеса, вул. Мельницька, буд. 20а https://orcid.org/0000-0001-7247-2910
  • О. Л. Гарєєв ТОВ «ВИРОБНИЧА ФІРМА СІМЕСТА», Україна, 65005, м. Одеса, вул. Мельницька, буд. 20а
DOI: https://doi.org/10.7124/FEEO.v36.1712
Ключові слова: котячий коронавірус (FCoV), ПЛР, ЗТ-ПЛР, ЗТ-ПЛР в реальному часі, аналіз кривих плавлення

Анотація

Мета. Розробка ефективної тест-системи для діагностики коронавірусної хвороби котів на основі полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією (ЗТ-ПЛР). Методи. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР); полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією (ЗТ-ПЛР); ЗТ-ПЛР у реальному часі. Аналіз кривих плавлення. Електрофорез у поліакріламідному гелі. Статистичні методи. Результати. Розроблено ПЛР тест-систему з електрофоретичною детекцією та ПЛР тест-систему у реальному часі для виявлення коронавірусу котів (FCoV). Показано переваги ПЛР тест-системи у реальному часі та оцінено її ефективність. З використанням тест-системи у реальному часі проведено діагностику 160 котів та кішок та виявлено FCoV у 18 % досліджених тварин. Висновки. Висока діагностична ефективність ПЛР тест-системи у реальному часі дозволяє використовувати її для діагностики коронавірусної хвороби котів в лабораторних умовах. Незважаючи на те, що коронавірусна хвороба котів не належить до сезонних захворювань, було виявлено залежність частоти виявлення FCoV від сезону. Частота виявлення FCoV навесні становила 28 %, влітку зменшувалася до 11 %, а у вересні знову збільшувалася до 24 %. Однією з причин сезонних коливань може бути послаблення імунітету у тварин восени та навесні, що може впливати на ризик інфікування або реактивацію вірусу.

Посилання

Hagemeijer M. C., Rottier P. J., de Haan C. A. Biogenesis and dynamics of the coronavirus replicative structures. Viruses. 2012. Vol. 4. P. 3245–3269. https://doi.org/10.3390/v4113245.

Tekes G., Thiel H. J. Feline Coronaviruses: Pathogenesis of Feline Infectious Peritonitis. Advances in Virus Research. 2016. Vol. 96. P. 193–218. https://doi.org/10.1016/bs.aivir.2016.08.002.

Pedersen N. C. An Update on Feline Infectious Peritonitis: Diagnostics and Therapeutics. Vet. J. 2014. Vol. 201. P. 133–141. https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2014.04.016.

Taharaguchi S., Soma T., Hara M. Prevalence of feline coronavirus antibodies in Japanese domestic cats during the past decade. J. Vet. Med. Sci. 2012. Vol. 74 (10). P. 1355–1358. https://doi.org/10.1292/jvms.11-0577.

Spada E., Carrera Nulla A., Perego R., Baggiani L., Proverbio D. Evaluation of Association between Blood Phenotypes A, B and AB and Feline Coronavirus Infection in Cats. Pathogens. 2022. 11. 917. https://doi.org/10.3390/pathogens11080917.

Kokkinaki K. C. G., Saridomichelakis M. N., Mylonakis M. E., Leontides L., Xenoulis P. G. Seroprevalence of and risk factors for feline coronavirus infection in cats from Greece. Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. 2023. 94. 101962. https://doi.org/10.1016/j.cimid.2023.101962.

Klein-Richers U., Hartmann K., Hofmann-Lehmann R., Unterer S., Bergmann M., Rieger A., Leutenegger C., Pantchev N., Balzer J., Felten S. Prevalence of Feline Coronavirus Shedding in German Catteries and Associated Risk Factors. Viruses. 2020. 12, 1000. https://doi.org/10.3390/v12091000.

Gao Y. Y., Wang Q., Liang X. Y., Zhang S., Bao D., Zhao H., Li S. B., Wang K., Hu G. X., Gao F. S. An updated review of feline coronavirus: Mind the two biotypes. Virus Res. 2023. Vol. 326, 199059. https://doi.org/10.1016/j.virusres.2023.199059.

Barker E. N., Tasker S. Advances in Molecular Diagnostics and Treatment of Feline Infectious Peritonitis. Adv. Small Anim. Care. 2020. Vol. 1. P. 161–188. https://doi.org/10.1016/j.yasa.2020.07.011.

Barker E. N., Tasker S., Gruffydd-Jones T. J., Tuplin C. K., Burton K., Porter E., Day M. J., Harley R., Fews D., Helps C. R. Phylogenetic analysis of feline coronavirus strains in an epizootic outbreak of feline infectious peritonitis. J. Vet. Intern. Med. 2013. Vol. 27 (3). P. 445–450. https://doi.org/10.1111/jvim.12058.

Pedersen N. C. An Update on Feline Infectious Peritonitis: Virology and Immunopathogenesis. Vet. J. 2014. 201. P. 123–132. https://doi.org/10.1016/j.tvjl.2014.04.017.

Tasker S., Addie D. D., Egberink H., Hofmann-Lehmann R., Hosie M. J., Truyen U., Belák S., Boucraut-Baralon C., Frymus T., Lloret A. Feline Infectious Peritonitis: European Advisory Board on Cat Diseases Guidelines. Viruses. 2023. 15. 1847. https://doi.org/10.3390/v15091847.

Addie D., Covell-Ritchie J., Jarrett O., Fosbery M. Rapid Resolution of Non-Effusive Feline Infectious Peritonitis Uveitis with an Oral Adenosine Nucleoside Analogue and Feline Interferon Omega. Viruses. 2020. 12. 1216. https://doi.org/10.3390/v12111216.

Doenges S. J., Weber K., Dorsch R., Fux R., Hartmann K. Comparison of real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction of peripheral blood mononuclear cells, serum and cell-free body cavity effusion for the diagnosis of feline infectious peritonitis. J. Feline Med. Surg. 2016. Vol. 19. P. 344–350. https://doi.org/10.1177/1098612X15625354.

Kobialka R. M., Ceruti A., Bergmann M., Hartmann K., Truyen U., Abd El Wahed A. Molecular Detection of Feline Coronavirus Based on Recombinase Polymerase Amplification Assay. Pathogens. 2021. Vol. 10. 1237. https://doi.org/10.3390/ patho-gens10101237.

Barua S, Sarkar S., Chenoweth K., Johnson C., Delmain D., Wang C. Insights on feline infectious peritonitis risk factors and sampling strategies from polymerase chain reaction analysis of feline coronavirus in large-scale nationwide submissions. J Am Vet Med Assoc. 2024. Vol. 263 (1). P. 82–89. https://doi.org/10.2460/javma.24.03.0208.